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病菌 PCR 分型诊断方法第1部分：大肠杆菌 PCR 检测方法现行

Method of PCR typing diagnosis for bacterial Part1：Method of PCR detection for Escherichia coli

标准号：DB21/T 2734.1-2017

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基本信息

标准号：DB21/T 2734.1-2017

发布时间：2017-02-23

实施时间：2017-03-23

首发日期：

起草人：赵凤菊、赵晓彤、关淼、关乃鹏、李蓉、陈瑶、张雅为、魏澍、李冰、高慎阳、蔡景明、王宏军、王竹、邓文超

标准分类：动物检疫、兽医与疫病防治

ICS分类：兽医学

提出单位：辽宁省动物疫病预防控制中心

起草单位：辽宁省动物疫病预防控制中心、辽宁省动物医学研究院

归口单位：辽宁省畜牧兽医局

发布部门：辽宁省质量技术监督局

主管部门：辽宁省畜牧兽医局

标准简介

本标准规定了大肠杆菌PCR检测方法的技术要求。本标准适用于大肠杆菌的诊断、监测及流行病学调查，适用于动物粪便、脏器及纯培养物中大肠杆菌的检测。本标准中的试验操作应在生物安全Ⅱ级（BSL-2）以上的实验室进行。

标准摘要

标准《病菌 PCR 分型诊断方法》按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。
标准《病菌 PCR 分型诊断方法》分为两个部分：
——第 1 部分：大肠杆菌 PCR 检测方法；
——第 2 部分：产气荚膜梭菌 PCR 分型检测方法。
本部分为病菌 PCR 分型诊断方法的第 1 部分。
本分由辽宁省动物疫病预防控制中心提出。
本标准由辽宁省畜牧兽医局归口。
本标准起草单位：辽宁省动物疫病预防控制中心、辽宁省动物医学研究院。
本标准主要起草人：赵凤菊、赵晓彤、关淼、关乃鹏、李蓉、陈瑶、张雅为、魏澍、李冰、高慎阳、蔡景明、王宏军、王竹、邓文超。

标准目录

前言 II
1 范围 1
2 规范性引用文件 1
3 缩略语 1
4 原理 1
5 仪器和器材 1
6 试剂和材料 1
7 操作步骤 2
71 样品的采集、前处理、存放与运输 2
711 采样注意事项 2
712 采样工具 2
713 内脏样品的采集与前处理 2
714 内容物的采集与前处理 2
715 粪便的采集与前处理 2
716 血液 2
717 大肠杆菌纯培养物 3
718 保存与运输 3
72 PCR 检测 3
721 DNA 提取 3
722 PCR 3
7222 PCR 反应条件 3
7223 电泳 4
8 试验成立的条件 4
9 结果判定 4
附录 A（规范性附录）试剂配制 5
A1 电泳缓冲液（50 倍） 5
A11 05mol/L 乙二铵四乙酸二钠（EDTA）溶液（pH 80） 5
A12 TAE(三羟甲基氨基甲烷一乙酸)电泳缓冲液(50 倍) 5
A2 1%琼脂糖凝胶 5

替代情况

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引用标准

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采标情况

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