病菌 PCR 分型诊断方法 第2部分：产气荚膜梭菌 PCR 分型检测方法 现行
Method of PCR typing diagnosis for bacterial Part2：Method of PCR typing detection for Clostridium perfringens
标准号：DB21/T 2734.2-2017
基本信息
标准号：DB21/T 2734.2-2017
发布时间：2017-02-23
实施时间：2017-03-23
首发日期：
起草人：赵凤菊、顾贵波、关淼、杨本勇、于长泳、李井春、马建山、魏园园、梁乔、张雷、郑付华、王欣、邓文超、王竹
标准分类： 动物检疫、兽医与疫病防治
ICS分类：兽医学
提出单位：辽宁省动物疫病预防控制中心
起草单位：辽宁省动物疫病预防控制中心、辽宁省动物医学研究院
归口单位：辽宁省畜牧兽医局
发布部门：辽宁省质量技术监督局
主管部门：辽宁省畜牧兽医局
标准简介
本标准规定了产气荚膜梭菌A、B、C、D、E 五型PCR检测方法的技术要求。 本标准适用于产气荚膜梭菌病的诊断、监测及流行病学调查，适用于动物粪便、肠内容物及纯培养物中产气荚膜梭菌α-毒素、β-毒素、ε-毒素和ι-毒素基因的PCR检测。 本标准中的试验操作应在生物安全Ⅱ级（BSL-2）以上的实验室进行。
标准摘要
|
标准《病菌 PCR 分型诊断方法》按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 标准《病菌 PCR 分型诊断方法》分为两个部分： ——第 1 部分：大肠杆菌 PCR 检测方法； ——第 2 部分：产气荚膜梭菌 PCR 分型检测方法。 本部分为病菌 PCR 分型诊断方法的第 2 部分。 本分由辽宁省动物疫病预防控制中心提出。 本标准由辽宁省畜牧兽医局归口。 本标准起草单位：辽宁省动物疫病预防控制中心、辽宁省动物医学研究院。 本标准主要起草人：赵凤菊、顾贵波、关淼、杨本勇、于长泳、李井春、马建山、魏园园、梁乔、张雷、郑付华、王欣、邓文超、王竹。 |
标准目录
| 前言II 1范围1 2规范性引用文件1 3缩略语1 4原理1 5仪器和器材1 6试剂和引物1 61试剂2 62引物2 7操作步骤2 71样品的采集、前处理、存放与运输2 711采样注意事项2 712采样工具2 713肠内容物的采集与前处理2 714粪便的采集与前处理3 715产气荚膜梭菌纯培养物3 716存放与运送3 72PCR检测3 721DNA提取3 722PCR3 7222电泳PCR反应条件4 7223电泳4 8试验成立的条件4 9结果判定4 附录A（规范性附录）试剂配制5 A1电泳缓冲液（50倍）5 A1105mol/L乙二铵四乙酸二钠（EDTA）溶液（Ph80）5 A12TAE(三羟甲基氨基甲烷一乙酸)电泳缓冲液(50倍)5 A21%琼脂糖凝胶5 |
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